当前位置: 检验地带网 > 学术交流 > 检验论文 > 正文
关注:

葡萄糖即时检验院内室间质控品的制备和评价

2014-12-14来源:未知 阅读: 【字号:
导读: 自制的葡萄糖即时检验室间质控品配制简单,葡萄糖浓度24 h内保持稳定,且不会干扰快速葡萄糖仪的测定.符合葡萄糖即时检验室间质控要求。 即时检验(point.of care testing,POCT)具有快捷、简便等特点,尤以葡萄糖的测定最为普遍。为了保证葡萄糖POCT测定结

自制的葡萄糖即时检验室间质控品配制简单,葡萄糖浓度24 h内保持稳定,且不会干扰快速葡萄糖仪的测定.符合葡萄糖即时检验室间质控要求。

即时检验(point.of care testing,POCT)具有快捷、简便等特点,尤以葡萄糖的测定最为普遍。为了保证葡萄糖POCT测定结果的可靠性,全国临床检验标准化委员会颁布的《便携式血糖仪血液葡萄糖测定指南》已有明确规定。我们自制了葡萄糖POCT室间质评的全血质控品,并作评价。

1材料和方法

1.1仪器与试剂日立7600全自动生化分析仪(简称日立,葡萄糖测定采用己糖激酶法,试剂由宁波慈城生化试剂厂生产);快速血糖仪(雅培公司MediSense’OptiumTM,简称雅培;强生公司SureSt.epTMPlus简称强生;罗氏公司Glucotrend。2简称罗氏,均采用原公司配套试剂条)。甘油醛:Sigma公司产品;氟化钠:上海产;ATP:Roche公司产品;肝素钠注射液(6 250 U/m1):江苏万邦生化医药股份有限公司产品。1.2采血管准备甘油醛一氟化钠抗酵解管:每管加入250 umol/ml甘油醛25ul,和20 mg/ml的氟化钠溶液12.5ul,37℃烘干备用。肝素抗凝管:含6250 U/ml的肝素钠注射液8ul,37℃烘干备用。氢氧化钠管:加入125 ul 1 mmol/ml的NaOH,37℃烘干备用。

1.3 ATP的抑糖酵解作用试验取肝素抗凝全血3 ml加入60 mg ATP后分装为3管,对照管亦取相同全血3 ml分为3管,分别于22℃即刻、8 h、24 h后离心,分离血浆后由生化分析仪检测葡萄糖浓度。

1.4全血质控品的制备取15份静脉血3 ml,加入肝素抗凝管中,混匀后取0.5 ml全血为对照组,首先在3种血糖仪上测全血葡萄糖浓度,然后离心取血浆用日立生化分析仪测血浆葡萄糖浓度。剩余的2.5 ml全血离心分离血浆后,吸取血浆加人含有50 mg ATP的试管中,在振荡器上混匀使之溶解,然后加入氢氧化钠管,调节pH为7.4。将处理完毕的血浆吸回原血细胞,再加入甘油醛一氟化钠抗酵解管中,混匀后分装为4管备用。抗凝管中各种成份的最终浓度分别为氟化钠:0.1 mg/ml;甘油醛:2.5umol/ml;ATP:20 mg/ml;肝素钠:17 U/ml;NaOH:0.05 mmol/ml。

1.5全血质控品的稳定性试验取上述配制好的标本放置室温(实际温度22℃)2、8、24、48 h后,在3种血糖仪上测全血葡萄糖浓度,然后离心取血浆用日立生化分析仪测血浆葡萄糖浓度,并以肝素抗凝全血为对照管,每次测定重复2次取均值,通过与对照组比较确定葡萄糖浓度稳定的时间。

1.6统计学方法采用SPSS 10.0统计学软件包,实验结果以元x±s表示,不同时问段测定的葡萄糖结果比较用单因素方差分析,以LSD检验。

2结果

2.1 4种仪器检测葡萄糖的精密度试验取高、低葡萄糖肝素抗凝血标本,平行测定20次,计算批内CV,见表1(略)。

2.2 ATP的抑糖酵解作用葡萄糖初始浓度为5.6 mmol/L的肝素抗凝血加入ATP后葡萄糖浓度为5.66 mmol/L,22 oC 8 h和24 h检测结果分别为5.26 mmol/L、4.56 mmol/L,下降百分比为7.0%和19.4%;不含ATP的标本葡萄糖值为3.40 mmol/L、1.6 mmol/L,下降百分比分别为39.3%和71.4%,两者的差异有显著性意义(P<0.01)。

2.3全血质控品的稳定性试验与对照组(肝素抗凝血)比较,含有复合抗酵解剂的标本可使葡萄糖浓度在24 h内保持稳定,24 h内各时间段之间的结果差异无显著性意义(F=1.52,P>0.05),48 h的葡萄糖结果有所下降,与对照组结果比较,有显著性差异(P<0.01)。结果见表2(略)。

3讨论

临床上葡萄糖POCT所用的是快速葡萄糖仪,采用末梢全血作为测定标本,由于存在基质效应,全血质控品应该尽量不要改变血液的物理性状。另外,葡萄糖POCT室闾质评时,从中心实验室分发质控品到各POCT点检测,需要一定的时间,如果采用肝素抗凝全血,室温下每小时葡萄糖浓度将会下降5%~7%。为了保证葡萄糖浓度的稳定,必须在血液中添加一些抗凝和抗糖酵解剂。葡萄糖POCT采用的快速血糖仪所使用的方法属于干化学法范畴,并且使用全血标本,不同于传统的湿化学法采用血浆或血清标本,添加剂的影响可能会不同,有文献报道,血液中氟化钠浓度为2 mg/ml时,可使某些型号的快速血糖仪葡萄糖测定结果明显偏低,而对湿化学方法没有任何影响。由此可见,许多在传统的湿化学方法中被证明可.以有效抑制葡萄糖分解的物质,在用于血糖仪测定时均需要重新核实。

为了保证试验结果的可靠性,事先对每台仪器做不精密度测试,所有的CV均小于5%,表明各台仪器稳定性良好。初步试验发现,任何浓度的甘露糖均可明显干扰血糖仪的测定,4.0 mmol/L的甘油醛对罗氏全血糖仪有干扰,2.0 mg/ml的氟化钠对强生血糖仪有干扰。ATP是一种能量补充剂,实验证明20 mg/ml的ATP可以明显降低全血中葡萄糖的减少。由于ATP是一种酸性物质,可导致红细胞酸化甚至溶血,所以在使用ATP时要加入氢氧化钠调节pH到7.4。根据多次的试验,我们通过减少有干扰的抗糖酵解剂浓度,联合使用ATP的方法,最终选择氟化钠(0.1 mg/ml)一甘油醛(2.5 mmoL/L)-ATP(20 mg/ml)一肝素钠(17 U/ml)一氢氧化钠(o.05mol/L)这样一种组合试剂。评价结果是添加了复合抗酵解剂的全血标本,可以使葡萄糖浓度在室温(22℃)24 h内保持基本稳定,而且不会干扰雅培MediSense。OptiumTM血糖仪、强生SureStep Plus稳步型血糖仪、罗氏Glucotrend 2乐康全血糖仪的结果测定(均为目前使用较广泛的快速血糖仪),符合POCT室间质控要求,值得推广应用。

(责任编辑:admin)
------分隔线----------------------------

检验医学医学检验 质量控制 医学检验 检验医学 D-二聚体 检验科 糖尿病 生化分析仪 男人 乙肝 AFP 检验技士考试 HIV感染 输血 SOP 检验结果 HBV-DNA