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中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色及临床意义

2010-06-16来源:检验地带网 阅读: 【字号:
导读: 人体有多种细胞内含有一种叫做碱性磷酸酶的物质。血细胞内也含有这种物质,但多数不表现出活性,即处于沉睡状态,只有中性粒细胞的成熟阶段表现出碱性磷酸酶活性,我们称之为中性粒细胞碱性磷酸酶(简称NALP)。中性粒细胞碱性磷酸酶存在于成熟中性粒细胞的胞

    人体有多种细胞内含有一种叫做碱性磷酸酶的物质。血细胞内也含有这种物质,但多数不表现出活性,即处于“沉睡”状态,只有中性粒细胞的成熟阶段表现出碱性磷酸酶活性,我们称之为中性粒细胞碱性磷酸酶(简称N—ALP)。中性粒细胞碱性磷酸酶存在于成熟中性粒细胞的胞浆内,可以通过钙—钴方法使之着色来显示。然后计算出反应的阳性率和积分,即可表示中性粒细胞碱性磷酸酶活性的高低。计算方法:显微镜下观察100个成熟中性粒细胞,有阳性反应的细胞数即阳性率;再按下列标准评分,将每个细胞的积分相加,即得出积分:

  0分——阴性反应。

  1分——胞浆1/2以下的区域出现灰黑色到棕黑色沉淀。

  2分——胞浆1/2~3/4的区域出现灰黑色至棕黑色沉淀。

  3分——胞浆全部区域出现棕黑色或棕黑色沉淀(颗粒状或片块状),但密度较低,约占3/4的区域。

  4分——胞浆全部皆被深黑色团块状沉淀所充满,密度甚高,甚至遮盖胞核。

  正常人的中性粒细胞碱性磷酸酶活性为:阳性率平均为20~40%,积分平均为20~60分。当患有慢性粒细胞白血病时,其活性显着减低,积分常为“0”,缓解后也无明显增高;但慢粒急变后,N—ALP可增高。因此,中性粒细胞碱性磷酸酶活性的检查,对诊断慢性粒细胞白血病是极为有用的。

  但其它一些情况下,也可能出现中性粒细胞碱性磷酸酶活性减低,如急性粒细胞白血病时就可减低,但缓解后增高;病毒感染时可减低,但不如慢粒明显;恶性组织细胞增生症和淋巴瘤|检验地带网|时也会减低,但均不如慢粒那么显着。

  至于中性粒细胞碱性磷酸酶活性增高的情况则比较多见,如常见的细菌感染、类白血病反应、甲亢、贫血、特发性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。
   中性粒细胞碱性磷酸酶的显示方法有偶氮偶联法和钙-钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4~9.6的条件下,将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。钙-钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的β-甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化铵发生反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。

  碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞(分叶核及杆状核),其他血细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒,反应强度分为5级,即"-"、"1+"、"2+"、"3+"、"4+"。反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值来表示。血涂片染色后,在油浸镜下,观察100个成熟中性粒细胞,阳性反应细胞所占百分率即为阳性率;对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级,将各级所占的百分率乘以级数,然后相加,即为积分值。 成人NAP阳性率10%~40%;积分值40~80分。

  由于各实验室条件不同,参考值也有差异。 NAP活性可因年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素有一定的生理性变化。在病理情况下,NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。1. 感染性疾病:急性化脓菌感染时NAP活性明显增高,病毒性感染时其活性在正常范围或略低。2. 慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低,积分值常为0。类白血病反应的NAP活性极度增高,故可作为慢性粒细胞白血病|检验地带网|鉴别的一个重要指标。3. 急性粒细胞白血病时NAP积分值差错;急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增高;急性单核细胞白血病时一般正常或减低。4. 再障时NAP活性增高;阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低,因此也可作两者鉴别的参考。5. 其他血液病:恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性疾病如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨骨纤维化症NAP活性中度增高,恶性组织细胞病时NAP活性降低。6. 腺垂体或肾上腺皮质功能亢进时,应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等NAP积分值可增高。

    碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞,其他细胞均呈阴性反应。阳性反应为在胞质中出现灰色到棕黑色颗粒,反应强度分为5级,即-、+、2+、3+、4+。反应结果以阳性反应细胞的百分率和积分值来表示。血涂片经染色反应后,在油镜下,连续观察100个成熟中性粒细胞,记录其阳性反应细胞所占的百分率即为阳性率;并对所有阳性反应细胞逐个按其反应强度|检验地带网|作出+~4+的分级,将各级所占的百分率乘以级数,然后想加,即为积分值。参考值:阳性率10-40%,积分值40-80。意义:(1)急性化脓性感染时NAP活性明显升高,病毒性感染时其活性在正常范围或略低。因此,NAP可用于细菌和病毒感染的鉴别;(2)慢性粒细胞白血病的NAP活性明显降低,积分值常为0。类白血病反应的NAP活性极度增高,故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的重要指标。(3)急性粒细胞白血病时NAP积分值减低;急性淋巴细胞白血病的NAP多增高;急性单核细胞白血病时一般正常或减低。故可作为急性白血病的鉴别方法之一。(4)再生障碍性贫血时NAP活性增高;阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低,可作为两者的鉴别。(5)其他情况:如应用肾上腺皮质激素时NAP升高;恶性组织细胞病时NAP活性降低。

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